第二代试管婴儿与第一代的区别是：精子和卵子的结合方式不同。

试管婴儿第一代和第二代都是将精子和卵子取出，在体外进行受精，再将形成的早期胚胎移植回母体的技术，两代试管婴儿主要的区别在于精子和卵子的结合方式不同。

1.第一代试管婴儿即常规试管婴儿(IVF)，精子和卵子分别取出后放在实验室中一种特制的培养液中，让他们自由结合来实现受精过程。主要适用于患有严重的输卵管堵塞、多囊卵巢综合征、子宫内膜异位症等疾病的女性不孕患者。

2.第二代试管婴儿即卵胞浆内单精子注射(ICSI)，在显微镜下，取出单个精子，将其注射到卵细胞浆内，使卵细胞受精，然后经过短期发育再移植到母体的子宫内。主要适用于重度少弱精以及需睾丸取精的男性不育患者。

针对不孕症夫妇，需要试管婴儿时，必须到正规医院，有辅助生殖资质的医院，在专业医生的评估后，确定实施第一代试管还是第二代试管婴儿。